nfcore/eagernf-core/eager是一个基于Nextflow的生物信息学最佳实践分析流程,专为NGS测序的古DNA(aDNA)和现代DNA数据分析设计。该流程支持从原始FASTQ文件或预处理BAM文件输入开始,进行序列比对、广泛的通用NGS和aDNA特异性质量控制,并生成全面的分析结果。通过Docker容器化部署,确保安装简便且结果高度可重复。
流程默认执行以下步骤:
bwa、samtools和picard)FastQC进行测序数据质量评估AdapterRemoval完成接头去除及双端数据合并bwa aln、bwa mem或CircularMapper将 reads 映射到参考基因组samtools进行映射后处理、统计及BAM格式转换DamageProfiler分析C-to-T损伤模式DeDup或MarkDuplicates去除PCR重复Qualimap进行BAM质量评估preseq评估文库复杂度MultiQC生成整体流程统计摘要流程还包含以下附加功能:
fastp去除poly-G尾samtools实现BamUtil进行损伤去除或裁剪PMDTools提取并评估损伤readsGATK UnifiedGenotyper、GATK HaplotypeCaller或FreeBayes生成VCF文件VCF2Genome生成共识序列MultiVCFAnalyzer生成SNP表格MtNucRatioCalculator实现SexDetErrmine进行统计学性别判定MALT进行分类学分箱Kraken2实现无比对分类学分箱MaltExtract分析MALT分箱数据的aDNA特征适用于古DNA和现代DNA的NGS测序数据分析,尤其适合需要进行全面预处理、高精度序列映射、古DNA特异性损伤分析及多维度质量控制的研究场景。可广泛应用于古基因组学、进化生物学、人类学及相关领域的科研项目。
确保安装Nextflow(版本≥19.10.0):
bash# 安装Nextflow(Linux/macOS) curl -s [***] | bash # 将Nextflow添加到环境变量(或移动至PATH目录) chmod +x nextflow mv nextflow ~/bin/ # 假设~/bin在PATH中
选择以下一种容器环境安装:
bashnextflow pull nf-core/eager
使用提供的测试数据验证流程运行:
bashnextflow run nf-core/eager -profile <docker/singularity/conda>,test # 替换<docker/singularity/conda>为实际使用的容器环境,如使用Docker则为docker
bashnextflow run nf-core/eager -profile <docker/singularity/conda> \ --input '*_R{1,2}.fastq.gz' \ # 输入FASTQ文件(支持通配符) --fasta '<your_reference>.fasta' # 参考基因组FASTA文件路径
流程成功运行后,清理中间文件以释放空间:
bashnextflow clean -f -k
分析结果汇总报告(MultiQC报告)位于路径:./results/MultiQC/multiqc_report.html,可通过浏览器打开查看整体质量控制和分析统计结果。
完整文档位于项目docs/目录或nf-core官方主页,包含:
如需支持,可通过nf-core Slack频道获取帮助。
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