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nfcore/eager Docker 镜像 - 轩辕镜像

eager
nfcore/eager
nf-core/eager的Docker镜像,提供基于Nextflow的古DNA和现代DNA NGS数据分析最佳实践流程,支持从原始数据预处理、映射到质量控制的完整分析,包含古DNA损伤模式分析等特有功能,确保结果高度可重复。
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nf-core/eager Docker镜像文档

概述和主要用途

nf-core/eager是一个基于Nextflow的生物信息学最佳实践分析流程,专为NGS测序的古DNA(aDNA)和现代DNA数据分析设计。该流程支持从原始FASTQ文件或预处理BAM文件输入开始,进行序列比对、广泛的通用NGS和aDNA特异性质量控制,并生成全面的分析结果。通过Docker容器化部署,确保安装简便且结果高度可重复。

核心功能和特性

默认分析步骤

流程默认执行以下步骤:

  • 参考基因组索引创建:为映射生成参考基因组索引(bwa、samtools和picard)
  • 测序质量控制:使用FastQC进行测序数据质量评估
  • 测序接头去除与双端数据合并:通过AdapterRemoval完成接头去除及双端数据合并
  • 序列映射:使用bwa aln、bwa mem或CircularMapper将 reads 映射到参考基因组
  • 映射后处理:使用samtools进行映射后处理、统计及BAM格式转换
  • 古DNA损伤模式可视化:通过DamageProfiler分析C-to-T损伤模式
  • PCR重复序列去除:使用DeDup或MarkDuplicates去除PCR重复
  • 映射后统计与BAM质量控制:通过Qualimap进行BAM质量评估
  • 文库复杂度估计:使用preseq评估文库复杂度
  • 流程统计汇总:通过MultiQC生成整体流程统计摘要
附加功能

流程还包含以下附加功能:

预处理
  • Illumina双色测序仪poly-G尾去除:使用fastp去除poly-G尾
  • 未映射reads自动转换为FASTQ:通过samtools实现
  • 宿主DNA剥离:从输入FASTQ文件中去除宿主DNA(适用于敏感样本)
aDNA损伤处理
  • 损伤去除/裁剪:针对UDG+/UDG-half处理方案,使用BamUtil进行损伤去除或裁剪
  • 损伤reads提取与评估:通过PMDTools提取并评估损伤reads
基因分型
  • VCF基因分型文件创建:使用GATK UnifiedGenotyper、GATK HaplotypeCaller或FreeBayes生成VCF文件
  • 共识序列FASTA创建:通过VCF2Genome生成共识序列
  • SNP表格生成:使用MultiVCFAnalyzer生成SNP表格
生物学信息分析
  • 线粒体与核基因组reads比例计算:通过MtNucRatioCalculator实现
  • 人类样本性别鉴定:使用SexDetErrmine进行统计学性别判定
宏基因组筛选
  • 基于比对的分类学分箱:使用MALT进行分类学分箱
  • 无比对分类学分箱:通过Kraken2实现无比对分类学分箱
  • MALT分箱数据的aDNA特征筛选:使用MaltExtract分析MALT分箱数据的aDNA特征

使用场景和适用范围

适用于古DNA和现代DNA的NGS测序数据分析,尤其适合需要进行全面预处理、高精度序列映射、古DNA特异性损伤分析及多维度质量控制的研究场景。可广泛应用于古基因组学、进化生物学、人类学及相关领域的科研项目。

使用方法和配置说明

快速开始
1. 安装Nextflow

确保安装Nextflow(版本≥19.10.0):

bash
# 安装Nextflow(Linux/macOS)
curl -s [***] | bash
# 将Nextflow添加到环境变量(或移动至PATH目录)
chmod +x nextflow
mv nextflow ~/bin/  # 假设~/bin在PATH中
2. 安装容器环境

选择以下一种容器环境安装:

  • Docker:参考Docker官方安装文档
  • Singularity:参考Singularity官方文档
  • Conda:参考Conda安装文档
3. 拉取EAGER流程
bash
nextflow pull nf-core/eager
4. 测试流程

使用提供的测试数据验证流程运行:

bash
nextflow run nf-core/eager -profile <docker/singularity/conda>,test
# 替换<docker/singularity/conda>为实际使用的容器环境,如使用Docker则为docker
5. 运行实际数据分析
bash
nextflow run nf-core/eager -profile <docker/singularity/conda> \
  --input '*_R{1,2}.fastq.gz' \  # 输入FASTQ文件(支持通配符)
  --fasta '<your_reference>.fasta'  # 参考基因组FASTA文件路径
6. 清理中间文件

流程成功运行后,清理中间文件以释放空间:

bash
nextflow clean -f -k
结果查看

分析结果汇总报告(MultiQC报告)位于路径:./results/MultiQC/multiqc_report.html,可通过浏览器打开查看整体质量控制和分析统计结果。

文档与支持

完整文档位于项目docs/目录或nf-core官方主页,包含:

  • Nextflow安装指南
  • 流程配置(安装、自定义系统配置、参考基因组设置)
  • 运行流程详细说明
  • 输出结果解释
  • 代码贡献指南
  • 故障排除建议

如需支持,可通过nf-core Slack频道获取帮助。

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oldzhang

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